原理:无微华斯采用发射波长位于近红外二区(NIR-Ⅱ,>1000 nm)的荧光微球作为信号标记物,将其与特异性抗体偶联,构建免疫检测体系。在检测过程中,样本中的目标分析物与标记有 NIR-Ⅱ 荧光微球的抗体发生特异性免疫反应,并在检测卡上形成可被定量识别的荧光信号。专用检测仪(NIR-1000)在 NIR-Ⅱ 波段采集荧光信号强度,并结合预先建立的标准曲线,将荧光信号转换为目标物的定量结果。该方法本质上属于免疫层析检测技术与 NIR-Ⅱ 光学检测的结合,通过选择更优的光学窗口,提高检测信噪比与定量稳定性。
优势:
- A. 显著降低背景干扰,提高信噪比:在 NIR-Ⅱ 波段,常见生物基质(血红蛋白、脂类、胆红素等)的吸收、散射及自发荧光显著降低,相比可见光和近红外一区(NIR-I)荧光标记,背景噪声更低,从而获得更高信噪比(SNR)。
- B. 提升检测灵敏度,利于低浓度定量:低背景条件下,NIR-Ⅱ 荧光微球的有效信号更易被区分和放大,使免疫检测在无需磁珠分离或复杂清洗步骤的情况下,仍可实现接近化学发光方法的检测灵敏度。
- C. 定量稳定性更好,重复性更高:NIR-Ⅱ 波段受环境光干扰小,且检测信号对样本颜色、轻度溶血或脂血的敏感性降低,有助于提高批内、批间重复性,增强定量检测的稳定性与一致性。
- D. 兼顾高性能与操作简便:该技术在检测流程上仍保持免疫层析操作简单、反应快速的优势。
- E. 为多项目扩展和平台化检测提供基础:NIR-Ⅱ 荧光微球具有良好的光学可调性和批次一致性,便于不同检测项目在同一平台上实现标准化、可扩展的定量检测体系。